凍干機適用于大多數(shù)細(xì)菌、放線菌,、病毒,、噬菌體,、立克次體、霉菌和酵母等的真空冷凍干燥保藏,，但不適于霉菌的菌絲型,、菇類、藻類和原蟲等,。其操作流程如下：

1,、安瓿管準(zhǔn)備

     安瓿管材料以中性玻璃為宜。清洗安瓿管時,，先用2%鹽酸浸泡過夜,，自來水沖洗干凈后，用蒸餾水浸泡至pH中性,，干燥后,、貼上標(biāo)簽，標(biāo)上菌號及時間,，加入脫脂棉塞后,，121℃下高壓滅菌15-20分鐘，備用。

2,、保護劑的選擇和準(zhǔn)備

     保護劑種類要根據(jù)微生物類別選擇,。配制保護劑時，應(yīng)注意其濃度及pH值,，以及滅菌方法,。如血清，可用過濾滅菌,；牛奶要先脫脂,，用離心方法去除上層油脂，一般在100℃間歇煮沸2-3次,，每次10-30分鐘,，備用。

3,、凍干樣品的準(zhǔn)備

     在zui適宜的培養(yǎng)條件下將細(xì)胞培養(yǎng)至靜止期或成熟期,，進行純度檢查后（參見科技部自然科技資源平臺聯(lián)合管理辦公室文件《微生物菌種純度檢測技術(shù)規(guī)程》（試行）），與保護劑混合均勻,，分裝,。微生物培養(yǎng)物濃度以細(xì)胞或孢子不少于108-1010個/ml為宜（以大腸桿菌為例，為了取得每毫升1010個活細(xì)胞菌液2毫升-2.5毫升,，只需10毫升瓊脂斜面兩支）,。采用較長的毛細(xì)滴管，直接滴入安瓿管底部,，注意不要濺污上部管壁,，每管分裝量約0.1-0.2毫升，若是球形安瓿管,，裝量為半個球部,。若是液體培養(yǎng)的微生物，應(yīng)離心去除培養(yǎng)基,，然后將培養(yǎng)物與保護劑混勻,，再分裝于安瓿管中。分裝安瓿管時間盡量要短,，在1-2小時內(nèi)分裝完畢并預(yù)凍,。分裝時應(yīng)注意在無菌條件下操作。

4,、預(yù)凍

    一般預(yù)凍2小時以上,，溫度達到-20℃到-35℃左右。

5,、冷凍干燥

   采用冷凍干燥機進行冷凍干燥。將冷凍后的樣品安瓿管置于冷凍干燥機的干燥箱內(nèi)，開始冷凍干燥,，時間一般為8-20小時,。

終止干燥時間應(yīng)根據(jù)下列情況判斷：

——  安瓿管內(nèi)凍干物呈酥塊狀或松散片狀

——  真空度接近空載時的zui高值

——  樣品溫度與管外溫度接近

——  選用1-2支對照管，其水份與菌懸液同量,，視為干燥完結(jié)

——  選用一個安瓿管,，裝1-2%氯化鈷，如變深蘭色,，可視為干燥完結(jié)

冷凍干燥完畢后,，取出樣品安瓿管置于干燥器內(nèi)，備用,。

6,、真空封口及真空檢驗

     將安瓿管頸部用強火焰拉細(xì)，然后采用真空泵抽真空,，在真空條件下將安瓿管頸部加熱熔封,。

     熔封后的干燥管可采用高頻電火花真空測定儀測定真空度。

7,、保藏

     安瓿管應(yīng)低溫避光保藏,。

8、質(zhì)量檢查

    冷凍干燥后抽取若干支安瓿管進行各項指標(biāo)檢查,，如存活率,、生產(chǎn)能力、形態(tài)變異,、雜菌污染等,。